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ApoE小鼠
发布时间:2019-10-23 13:52:40 | 浏览量:1447

来源:

ApoE 基因敲除小鼠是通过同源重组技术制备的具有 3 号外显子纯合缺失的小鼠模型。2017 年斯贝福(北 京)生物技术有限公司从国家啮齿类实验动物种子中心引入培育。


特征:

  • ApoE 小鼠模型表现出异常高血脂症状,在 3 月龄时即出现动脉脂肪堆积,17 月龄时小鼠脑内将出现脂瘤 性纤维瘤。

  • 学习记忆能力出现障碍,其与 CHD、高脂血症、脑梗塞、AD 及慢性乙型肝炎等疾病相关。


用途:

用于研究 ApoE 基因相关疾病,如糖尿病与肥胖研究,心血管研究,动脉粥样硬化研究以及新陈代谢研究。


生长曲线:

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生理生化数据:

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基因鉴定报告

样本信息和目的

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方法和结果:

ApoE(apolipoprotein E)是载脂蛋白 E,一种脂肪结合蛋白(载脂蛋白),乳糜微粒和中密度脂蛋白(IDLs) 的一部分。ApoE 主要负责运输脂蛋白、脂溶性维生素及胆固醇。ApoE 基因位于 Chr7 上,共有 7 个外显子。

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查询目前所有 ApoE 敲除品系的设计方案和基因型鉴 定方案,结果显示目前的方案主要有两种:胚胎干细 胞技术和 CRISPR/Cas9 方案,针对两种方案分别设 计扩增和测序引物,具体方案如表1:

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ApoE 纯合子靶基因 PCR 扩增及琼脂糖凝胶电泳 结果如图 2,结果显示,该动物为 ES 干细胞法制 作的 ApoE 突变小鼠。 注:1、2为方案1扩增结果,3、4为方案2扩增结果,5、6为方案3扩增结果。1、3、5泳道基因组模板为ApoE小鼠,2、4、6 泳道为空白对照组,模板为水。

7.jpg7.jpg7.jpg


ApoE 突变小鼠是 Nobuyo Maeda 博士在 The  University of North Carolina 开发的,他们使用胚胎 干细胞技术产生 ApoE 基因突变的小鼠品系,质 粒载体设计方案如图 3:

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使用oIMR0180和oIMR0182引物对靶基因进行扩增进行双向Sanger测序。与NCBI报道的ApoE基因外显子序列(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NM_009696.4)比对,结果显示:oIMR0180 引物正向测序比对 失败(结果未显示),oIMR0182 反向测序,ApoE 基因 3 号外显子部分序列可以拟合。ApoE 基因外显子序列 上 289 号碱基开始 3 号外显子剩余序列被 Neo 基因(新霉素抗性基因 )所取代(如图 4)。ApoE 基因其他外 显子扩增测序结果未显示突变。

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结论:

斯贝福(北京)生物技术有限公司 ApoE 小鼠的基因编辑类型为:ApoE 基因 3 号外显子部分碱基(125bp) 和部分内含子被 Neo 基因取代,其他外显子无突变。

 
 
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