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db/db 小鼠
发布时间:2020-07-14 10:01:10 | 浏览量:1494

来源:

db/db 小鼠为瘦素受体自发性突变小鼠,由 Bar Harbor 于 1966 年在 C57BLKS/J(BKS)近交系中发现。

 

特征:

多食、消渴、多尿、极度肥胖。表型的严重程度受基因背景的影响。

◇表现出心肌病、周围神经病变、糖尿病视网膜病变、伤口愈合迟滞等糖尿病并发症。

◇易肥胖,体重增长快,活动减少,血脂高,幼年时血糖和胰岛素增长不明显,后期血糖和胰岛素水平上升。

◇相对于野生型小鼠,db/db 小鼠能够增加胰岛素的敏感性,脂肪细胞也有所增加


途:

db/db 小鼠用于糖尿病与肥胖、代谢、伤口愈合、免疫与炎症、内分泌、生殖等方面的研究。T2D 型糖尿病模型,应用于糖尿病的药物筛选、肥胖症的生理生化指标及药物治疗等的研究。


dbdb小鼠血糖:

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基因鉴定报告


样本信息和目的:


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方法和结果

LRPR(leptin receptor,瘦素受体,又名db )蛋白属于细胞因子受体 gp130 家族,该蛋白通过激活胞质 STAT  蛋白来刺激基因转录。LRPR 是瘦素(调节体重的脂肪细胞特异性激素)的受体,并参与脂肪代谢的调节以 及正常淋巴细胞生成所需要的新型造血途径。该基因的突变与肥胖和垂体功能障碍有关。Lepr基因位于小 鼠 4 号染色体上,有 21 个外显子(图1)。

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文献查询显示,db/db 小鼠 Lepr 基因中内含子从 G 到 T 的转化产生了一个供体剪接位点,该剪接位点导致异常 剪接,导致 Ob-Rb 剪接形式的长细胞结构域过早终止,失去其信号转导功能,我们以 db/db 小鼠、C57 小鼠 (6-10)和灰色小鼠(m/m)的基因组为模板、使用文献(Acta Pharmacologica Sinica (2018) 39: 117–123)中报道的引物:FO-1:5′-TTGTTCCCTTGTTCTTATACCTATTCTGA-3′ RO-1:5′-CTGTAACAAAATAGGTTCTGACAGCAAC-3′ FI-1:5′- ATTAGAAGATGTTTACATTTTGATGGAAGG-3′ RI-1:5′- GTCATTCAAACCATAGTTTAGGTTTGTCTA-3′ 纯合子:610bp 和 406bp;野生型:610bp 和 264bp;杂合子:610bp、406bp 和 264bp 进行 Lepr 基因的扩增,结 果显示:db/db 纯合子表现出 610bp 和 406bp 两条带,C57 小鼠(6-10)和灰色小鼠(m/m)表现出 610bp 和 406bp 两条带,符合文献报道。同时对 db/db 小鼠的 610bp 条带进行测序,结果显示在内含子 18(转录本 201  E18-E19 中)上有一个 G 到 T 的突变。

此外,为了鉴定 db/db 小鼠 lepr 基因无其他突变,我们对 Lepr 基因的外显子进行全测序。Lepr 基因有多个转 录本信息(图 2),为了检测 db/db小鼠基因突变类型,我们使用转录本 201(外显子有 19 个)设计各外显子的  PCR扩增和测序引物(表 1),并对 db/db 小鼠的 DNA 模板进行 19 个外显子进行 PCR 扩增和测序。


微信截图_20210922152342.jpg

http://asia.ensembl.org/Mus_musculus/Transcript/Exons?db=core;g=ENSMUSG00000057722;  

r=4:101717404-101815352;t=ENSMUST0000003755

 
 
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